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美西林为第三代广谱半合成青霉素，是从半合成的脒基类半合成青霉素中找到的一种新的化合物，经酶水解而半合成的氮卓脒青霉素。美西林为杀菌剂，是通过干扰细菌细胞壁的生物合成而起抗菌作用。

美西林主要作用于细菌的转肽酶。美西林对革兰阴性菌，包括大肠杆菌、克雷白菌属、肠杆菌属、枸橼酸杆菌、志贺菌、沙门菌和部分沙雷杆菌等有良好的抗菌作用;对革兰阳性菌作用较弱;对假单胞菌、吲哚阳性变形杆菌、奈瑟菌属、厌氧杆菌和肠球菌等无效。

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